紫外分光光度計原理是分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團的信息,可用標準光譜圖再結合其它手段進行定性分析。根據Lambert-Beer定律:A=εbc(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數,為液池厚度,c為溶液濃度)可以對溶液進行定量分析。
紫外分光光度計所用比色皿的分類:
比色皿的制造工藝有兩種:一種是粘合劑粘合而成;另一種是高溫熔融而成。
比色皿的材料通常來源于石英、熔凝硅石和光學玻璃。
常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形,容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細管皿。另外還有高、低溫恒溫比色皿。
比色皿按照使用的波長范圍分:可見光系列(稱玻璃比色皿);紫外可見光系列(稱石英比色皿);紅外光系列(稱紅外石英比色皿)。
紫外分光光度計所用比色皿的選用:
紫外光度實驗中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學玻璃制成的比色皿,只能用于可見光區(qū),適用于330-1000nm波長范圍,石英比色皿是用熔融石英(氧化硅)制成的比色皿,既適用于紫外光區(qū),也可用于可見光區(qū),適用于200-400nm波長范圍。
利用石英和玻璃比色皿在紫外光區(qū)和可見光區(qū)有無吸收的差異,在紫外光區(qū)時,由于玻璃比色皿強烈吸收紫外光,對實驗數據和結果有影響,石英比色皿不吸收紫外光,不會影響數據,因此在紫外光區(qū)不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿。而在可見光區(qū),玻璃的影響非常小,可忽略,和石英比色皿一樣均可以使用,但考慮到節(jié)約經濟的因素,由于玻璃比色皿的價格遠遠低于石英比色皿,通常選擇可見光區(qū)使用玻璃比色皿,紫外光區(qū)使用石英比色皿。